l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、构造、细胞上清及相干液体样本中鸡雌二醇（E2）的含量。
l 有用期：6个月
l 生存条件：2-8℃
l 本试剂盒仅供体外研讨利用，不消于临床诊断
实行原理
试剂盒接纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）。往事后包被鸡雌二醇（E2）捕捉抗体的包被微孔中，顺次参加标本、尺度品、HRP标志的检测抗体，颠末温育并彻底洗濯。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终极的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡雌二醇（E2）呈正相干。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），盘算样品浓度。
样本处置惩罚及要求
1. 血清：全血标本请于室温安排2小时或4℃留宿后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃生存，但应制止重复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本收罗后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃生存，但应制止重复冻融。
3. 构造匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗构造，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响丈量结果），称重后将构造剪碎。将剪碎的构造与对应体积的PBS（一样平常按1:9的分量体积比，好比1g的构造样品对应9mL的PBS，详细体积可凭据实行必要得当调解，并做好记录。保举在PBS中参加卵白酶克制剂）参加玻璃匀浆器中，于冰上充实研磨。为了进一步裂解构造细胞，可以对匀浆液举行超声破裂，或重复冻融。末了将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞造就物上清或别的生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃生存，但应制止重复冻融。
注：标本溶血会影响末了检测结果，因而溶血标本不宜举行此项检测。
标本处置惩罚
1. 本公司只对试剂盒自己卖力，不合错误因利用该试剂盒所形成的样本斲丧卖力，请利用者利用前充实思量到样本的大概利用量，预留富足的样本。
2. 实行前应预测标本含量，要是标本浓渡过高，应对标本举行浓缩，使浓缩后的标本切合试剂盒的检测范畴，盘算时再乘以相应的浓缩倍数。标本利用0.01mol/L的PBS浓缩(PH=7.0-7.2)。
3. 若所检样本不包罗在阐明书所列样本之中，发起举行预实行验证其有用性，并细致保存样本。
4. 利用化学裂解液制备的构造匀浆或细胞提取液大概会由于某些化学物质的引入招致ELISA实行结果毛病。
5. 若样本为细胞造就上清，因该类样本滋扰要素较多，如：细胞形态、细胞数目、采样工夫等，以是大概存在检测不出的环境。
6. 某些自然卵白或重组卵白，包罗原核及真核重组卵白，大概由于与本产物所利用的检测抗体及捕捉抗体不立室，而不被检测出。
7. 发起利用奇怪样本，生存工夫过长大概会存在卵白降解或变性招致实行结果毛病。
必要而未提供的试剂和东西
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
试剂盒构成
| 称号 | 96孔设置装备摆设 | 48孔设置装备摆设 | 备注 |
| 微孔酶标板 | 8孔×12条 | 8孔×6条 | 无 |
| 尺度品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
| 样本浓缩液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
| 20×洗濯缓冲液 | 25mL | 15mL | 按阐明书举行浓缩 |
| 底物A | 6mL | 3mL | 无 |
| 底物B | 6mL | 3mL | 无 |
| 停止液 | 6mL | 3mL | 无 |
| 封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
| 阐明书 | 1份 | 1份 | 无 |
| 自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
备注：
1. 尺度品浓度顺次为：480、240、120、60、30、0 pg/mL
2. 颠末少量正常标本查验，标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范畴内，实行历程中间接取50μL样本上样即可。当有部门样本值凌驾最大尺度品浓度时，可用样本浓缩液将标本举行得当浓缩后再举行实行。
细致事变
1. 严酷根据划定的工夫和温度举行温育以包管正确结果。全部试剂都必需在利用前到达室温20-25℃。利用后立刻冷藏生存试剂。
2. 洗板不准确可以招致禁绝确的结果。在参加底物前确保只管即便吸干孔内液体。温育历程中不要让微孔枯燥失。
3. 消弭板底残留的液体和手指印，不然影响OD值。
4. 底物显色液应呈无色或很浅的颜色，曾经变蓝的底物液不克不及利用。
5. 制止试剂和标本的交织净化以免形成错误结果。
6. 在贮存和温育时制止强光间接照射。
7. 均衡至室温后再翻开密封袋以防水点凝结在冷板条上。
8. 任何反响试剂不克不及打仗漂白溶剂或漂白溶剂所分发的猛烈气体。任何漂白身分都市粉碎试剂盒中反响试剂的生物活性。
9. 不克不及利用逾期产物。
10. 要是大概流传疾病，全部的样品都应办理好，根据划定的步伐处置惩罚样品和检测安装。
试剂预备
试剂盒从冷藏情况中取出应在室温均衡前方可利用。
20×洗濯缓冲液的浓缩：蒸馏水按1：20浓缩，即1份20×洗濯缓冲液加19份蒸馏水。
操纵步调
1. 从室温均衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置尺度品孔和样本孔，尺度品孔各加差别浓度的尺度品50μL；
3. 样本孔中参加待测样本50μL；空缺孔不加。
4. 除空缺孔外，尺度品孔和样本孔中每孔参加辣根过氧化物酶（HRP）标志的检测抗体100μL，用封板膜封住反响孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗濯液（350μL），静置1min，甩去洗濯液，吸水纸上拍干，云云反复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔参加底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔参加停止液50μL，15min内，在450nm波优点测定各孔的OD值。
实行结果盘算
以所测尺度品的OD值为横坐标，尺度品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相干软件绘制尺度曲线，并失掉直线回归方程，将样品的OD值代入方程，盘算出样品的浓度。
试剂盒功能
1. 检测范畴：15 pg/mL – 480 pg/mL。
2. 敏捷度：最低检测浓度小于1.0 pg/mL。
3. 特异性：不与别的可溶性布局雷同物交织反响。
4. 反复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。
阐明
1. 由于现有条件及迷信技能程度尚不克不及对全部供货商提供的全部质料举行片面的判定与剖析，本产物大概存在肯定的质量技能危害。
2. 终极的实行结果与试剂的有用性、实行者的相干操纵以及其时的实行情况亲昵相干，请务必预备富足的标本备份。
3. 差别批次的统一产物大概会有少许差异，如：检测限、敏捷度以及显色工夫等，请根据试剂盒内阐明书举行实行操纵，网站电子版阐明书仅作参考。
4. 只要全部利用本试剂盒配套试剂才气包管检测结果，不克不及混用其他制造商的产物。只要严酷服从本试剂盒的实行阐明才会失掉最佳的检测结果。
题目解答
若实行结果欠好，请实时对显色结果照相，保存所用板条及未利用试剂，并妥善生存，然后接洽我公司技能支持为您办理题目。同时您也可以参考以下材料：
| 题目 | 大概缘故原由 | 办理方案 |
| 尺度曲线差 | 汲取及洗濯不充实 | 充实的汲取及洗濯 |
| 移液不准确 | 查抄和校正移液器 |
| 细密度低 | 洗濯不充实 | 按阐明书要求充实洗濯和浸泡 |
| 混匀不充实和汲取试剂不敷 | 充实混匀和汲取试剂 |
| 反复使用吸头、容器和覆膜 | 利用加样器要调换新的吸头、利用新的容器和覆膜 |
| 加样不准确 | 查抄和校正移液器 |
| O.D值低 | 每孔加的试剂量不准确 | 校正移液器，准确参加试剂 |
| 温育工夫不准确 | 包管富足的温育工夫 |
| 温育温度不准确 | 试剂要均衡至室温并包管正确的温育温度 |
| 酶标志物或底物生效 | 经过混淆酶标志物和底物，颜色应敏捷展现来查抄 |
| 没有参加停止液 | 根据阐明书实行操纵步调参加停止液 |
| 凌驾读数工夫读数 | 在阐明书保举的读数工夫内读数 |
| 样本值 | 不准确的样本贮存方法 | 准确贮存样本，利用奇怪样本举行实行 |
| 不准确的样本网络和处置惩罚要领 | 接纳准确的样本网络和处置惩罚要领 |
| 待测物质在样本中含量低 | 利用奇怪样本，反复实行 |
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